支原體是一種大小僅為0.2~0.3 um，無細胞壁，可透過一般過濾膜（0.22-0.45 um）的原核生物，在細胞培養(yǎng)過程中，支原體感染發(fā)生率達到63%，是細胞培養(yǎng)中令人頭疼的大問題。支原體污染可能來自培養(yǎng)基、血清或?qū)嶒灢僮髡?，會影響細胞生長率、細胞形態(tài)、基因表達、細胞代謝和細胞活力。支原體感染不易察覺，因此對培養(yǎng)細胞定期進行支原體檢測就非常重要。

那如何確定細胞是被支原體污染呢？

1、細胞形態(tài)改變
支原體污染比較嚴重時可出現(xiàn)生長減慢，有的培養(yǎng)基pH明顯變酸，并出現(xiàn)細胞病變，以此可依次對支原體污染進行檢測，但有些情況下支原體污染引起的病變特征與病毒感染相似，因此不能準確診斷。

2. 試劑盒檢測法：
愛必信支原體染色檢測試劑盒可用于在培養(yǎng)細胞中對支原體或其它原核生物進行原位染色檢測。主要用于檢測培養(yǎng)細胞中是否存在支原體污染。
培養(yǎng)細胞中的細菌污染、酵母污染或霉菌污染都在光學(xué)顯微鏡下可見，但支原體污染在光學(xué)顯微鏡下不可見，必須通過特定的檢測方法進行檢測。
檢測支原體污染的方法有很多種，包括支原體分離培養(yǎng)、支原體特異酶檢測、RT-PCR檢測以及DNA熒光染色檢測。該試劑盒是通過Hoechst染色來檢測支原體，可快速、有效、高靈敏度地檢測支原體污染。
如果發(fā)現(xiàn)有支原體污染，建議更換無污染的細胞進行培養(yǎng)。該試劑盒如用于六孔板樣品檢測，至少可以檢測100個樣品。

3 細胞間隙存在不動小黑點

如何預(yù)防支原體感染？

定期檢測：支原體感染會使培養(yǎng)細胞慢慢枯萎，因此對培養(yǎng)細胞定期進行支原體檢測非常重要。一般來說每1至3個月就應(yīng)該進行一次支原體檢測。將定期支原體檢測常規(guī)化堅持下去，是細胞培養(yǎng)實驗室應(yīng)對支原體感染的關(guān)鍵。使用愛必信支原體預(yù)防劑，可以有效的排除血清、培養(yǎng)基中可能存在的支原體，非抗生素類：多肽類，無耐藥性，無二次污染：隨著培養(yǎng)時間的延長，會被緩慢降解為氨基酸，可用于大規(guī)模發(fā)酵、細胞治療等領(lǐng)域，且細胞毒性小，已在多種細胞上進行過驗證?？梢苑判氖褂?/span>

如發(fā)現(xiàn)細胞已經(jīng)感染，如何清除支原體感染？

使用愛必信支原體清除試劑可以有效抑制和清除在培養(yǎng)細胞中廣泛存在的支原體污染。一方面可以用于消除細胞中已有的支原體污染，也可以用于防止支原體污染。 本試劑是一種篩選獲得的天然抗生素，抑制或清除支原體時的濃度比較低，對細胞沒有毒性。和細胞培養(yǎng)時所常用的青霉素和鏈霉素那樣，對細胞的各種檢測沒有干擾?？梢杂行б种撇⑶宄龑嶒炇页Ｒ娭гw，包括 Mycoplasma orale, M. arginini, M. hyorhinis和Acholeplasma laidlawii。通常在細胞培養(yǎng)液中加入本試劑約一周即可有效抑制或清除支原體。
 

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