大家都知道基質(zhì)膠用途廣泛,無論在成瘤、成管、干細(xì)胞包被,還是類器官培養(yǎng)中,都需要基質(zhì)膠這個得力助手。但基質(zhì)膠也是有“怪脾氣"的,稍有懈怠,它就凝給我們看,還死倔死倔地“不干活"嘞,所以咱們聊一聊基質(zhì)膠有哪些“怪脾氣"!
1、融化時間非常短,對高溫過度“敏感"
有小伙伴,是把基質(zhì)膠放在冰盒上融化的,冰盒是放在超凈臺上的,發(fā)現(xiàn)過了半小時基質(zhì)膠凝了。是的,為啥呢?
基質(zhì)膠如果不是全部插在冰里,一半暴露在空氣中,其融化時間很短,通常在冰上不超過30min就基本液化了,尤其是在炎熱的夏天,暴露在空氣中的一半很快會因?yàn)闇囟冗^高而凝固掉,所以,基質(zhì)膠較好的融化方法是在4℃冰箱過夜融化。
2、當(dāng)基質(zhì)膠不小心凝固后,當(dāng)天是不愿意再“干活"嘞
當(dāng)我們不小心讓基質(zhì)膠凝固了以后,采用冰水化合物降溫,采用4℃靜置2h,采用-20℃靜置10min,都無法“換醒"基質(zhì)膠,它就靜靜凝在那里“無動于衷"。是的,這就是基質(zhì)膠的“怪脾氣",“不搭理"人了。正確做法是先放-20℃,讓它進(jìn)入“冬眠"2h,然后放在4℃過夜融化,等第二天它就“流動"起來了,因?yàn)樗跋麣?著實(shí)慢呀。
3、基質(zhì)膠能反復(fù)凍融嗎?用不完咋辦?
基質(zhì)膠反復(fù)凍融,流動性會變差,用不完可以分裝到EP管凍存,為了減少反復(fù)凍融,我們推出的基質(zhì)膠1.5mL 4(abs9495)支裝的,每次用時,取出一支4℃過夜融化。如果一支用不完,可以放在4℃保存1個月,依然保持很好的流動性。
4、基質(zhì)膠融化完或使用時發(fā)現(xiàn)有氣泡咋辦?
基質(zhì)膠本身富含多種蛋白,粘滯性大,出現(xiàn)“吐氣泡"現(xiàn)象的原因主要是流動性變差。如果出現(xiàn)氣泡,使用時可以用桌面離心機(jī)2000r離1min,可有效去除小氣泡。
5、培養(yǎng)類器官時,怎樣避免基質(zhì)膠很快凝固?
采用金屬冰盒,效果更好,點(diǎn)膠前,將冰盒,槍頭,離心管,EP管放-20℃預(yù)冷1h以上,也就是和基質(zhì)膠接觸的東西(除孔板外)都進(jìn)行充分預(yù)冷,可以有效避免基質(zhì)膠凝固。
6、類器官傳代時,基質(zhì)膠和細(xì)胞團(tuán)分不開咋辦?
首先咱們可以采取一些有效的措施促進(jìn)兩者分離:
1)加入適量(10-14mL)緩沖液,稀釋基質(zhì)膠類器官混合物,能促進(jìn)分離;
2)將基質(zhì)膠類器官混合物放于-20℃,5min,加速基質(zhì)膠液化,能促進(jìn)分離;或者4℃靜置40min促進(jìn)基質(zhì)膠液化;
3)離心機(jī)的選擇非常重要,水平角離心機(jī)相比固定角離心機(jī)更利于基質(zhì)膠和類器官分離;
4)離心機(jī)的溫度最好是4℃(可避免基質(zhì)膠固化),離心轉(zhuǎn)速可適當(dāng)提高(最高不要超過500g),離心時間可適當(dāng)加長(最常不超過10min)。
其次如果采取了上述措施,基質(zhì)膠還是存在少量殘留怎么辦?
不要慌,如下圖所示,可以看到基質(zhì)膠和細(xì)胞團(tuán)混在一起(基質(zhì)膠里的白點(diǎn)為細(xì)胞團(tuán))。此時,我們可以摒棄掉上層緩沖液及基質(zhì)膠的上1/3,保留下2/3基質(zhì)膠細(xì)胞團(tuán)混懸物,并加新膠,混合點(diǎn)板。
7、基質(zhì)膠用途多多,不同基質(zhì)膠有不同用途,如下表:
貨號 | 品名 | 規(guī)格 | 應(yīng)用 |
abs9490 | 基質(zhì)膠(標(biāo)準(zhǔn)型,含酚紅) | 1.5mL×4/1.5mL×8 | 類器官培養(yǎng);細(xì)胞侵襲;細(xì)胞遷移 |
abs9491 | 基質(zhì)膠(標(biāo)準(zhǔn)型,無酚紅) | 1.5mL×8 | |
abs9492 | 基質(zhì)膠(高濃度,含酚紅) | 1.5mL×8 | 小鼠皮下成瘤;血管生成;凝膠栓塞 |
abs9493 | 基質(zhì)膠(高濃度,無酚紅) | 1.5mL×4/1.5mL×8 | |
abs9494 | 基質(zhì)膠(低因子,含酚紅) | 1.5mL×4/1.5mL×8 | 類器官培養(yǎng);與生長因子、信號途徑等相關(guān)的研究 |
abs9495 | 基質(zhì)膠(低因子,無酚紅) | 1.5mL×4/1.5mL×8 | |
abs9497 | 基質(zhì)膠(高濃度,低因子,含酚紅) | 1.5mL×8 | 小鼠皮下成瘤;血管生成;凝膠栓塞;與生長因子、信號途徑等相關(guān)的研究 |
abs9498 | 基質(zhì)膠(高濃度,低因子,無酚紅) | 1.5mL×8 | |
abs9496 | 基質(zhì)膠(IPS驗(yàn)證無酚紅) | 1.5mL×4 | 包被孔板,適用于人胚胎干細(xì)胞hES、誘導(dǎo)多能干細(xì)胞IPS 的擴(kuò)增和維持 |
abs9410 | 即用型基質(zhì)膠 | 100mL | 包被孔板,適用于難貼壁細(xì)胞(如293T,HUVEC)的擴(kuò)增和維持 |
8、另外買任意規(guī)格基質(zhì)膠,就送金屬冰盒,可以累加,此外還有買類器官試劑盒送培訓(xùn)班活動哦!!
本期小愛推薦:
貨號 | 品名 | 規(guī)格 |
abs9495 | 基質(zhì)膠(低因子、無酚紅) | 1.5ml*4/1.5ml*8 |
abs9446 | Organotial人乳腺癌類器官培養(yǎng)試劑盒 | 1kit |
abs9558 | Organotial人卵巢癌類器官培養(yǎng)試劑盒 | 1kit |
abs9590 | Organotial人宮頸癌類器官培養(yǎng)試劑盒 | 1kit |
abs9739 | Organotial人腦膠質(zhì)瘤類器官培養(yǎng)試劑盒 | 1kit |
abs9589 | Organotial人鼻咽癌類器官培養(yǎng)試劑盒 | 1kit |
abs9743 | Organotial人前列腺癌類器官培養(yǎng)試劑盒 | 1kit |
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Absin特色產(chǎn)品線:
WB相關(guān):ECL發(fā)光液、預(yù)染marker、預(yù)制膠;IHC相關(guān):二抗試劑盒、組化筆;IP/CoIP試劑盒;激動劑/抑制劑;血清、BSA、蛋白酶K、CTB、TTX、CEE;凋亡試劑盒;呼吸爆發(fā)試劑盒;ELISA試劑盒;重組蛋白;抗體: 二抗、標(biāo)簽抗體、對照抗體;定制服務(wù)(抗體/多肽/蛋白/標(biāo)記/檢測)...
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