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生化檢測試劑盒 | 銅離子檢測助力腫瘤治療研究

更新時間:2023-12-05      點擊次數(shù):811

背景介紹:

 

銅濃度檢測在藥物發(fā)現(xiàn)和環(huán)境監(jiān)測中得到廣泛應用。銅是人體必需的微量元素。銅蛋白酶在鐵和兒茶酚胺代謝,在清除自由基,血紅蛋白,彈性蛋白,膠原等方面扮演著重要角色。銅主要存在于肝臟中的銅藍蛋白中。銅含量過低會導致智力低下、色素缺失、貧血、肌肉緊張癥、骨質壞血病等疾病。

 

銅離子檢測在腫瘤研究中的應用:

 

歷史研究表明,銅穩(wěn)態(tài)失調與多種腫瘤有關,如婦科腫瘤、結直腸癌等,而癌癥患者血清銅水平的升高與癌癥分級和化療耐藥性有關,如果銅的濃度超過一定的閾值,就會中毒,導致一種新細胞死亡形式,稱為銅中毒,這種方式也被視為癌癥治療的潛在方法。

 

2023年10月20日,上海市第一人民醫(yī)院黃陳教授和范廣建教授團隊在Nature Communications雜志上發(fā)表了題為“Lactylation of METTL16 promotes cuproptosis via m6A-modification on FDX1 mRNA in gastric cancer"的研究論文。本研究揭示了METTL16調控胃癌細胞銅死亡的分子機制,闡明乳酰化修飾及m6A修飾在胃癌進展中的重要意義,為胃癌的治療提供新的靶標和策略。


圖 運用銅離子檢測試劑盒abs580140對48例胃癌患者的胃癌組織裂解物進行了銅含量檢測

 

銅離子檢測試劑盒:


試劑盒組分

規(guī)格

儲存條件

96-Well Microplate

1 plate

常溫

Assay Buffer

30 mL x 4

4℃

Reaction Buffer

4 mL x 1

4℃

Masking Reagent

Powder x 1

4℃

Dye Reagent

Powder x 1

4℃,避光保存

Dye Reagent Diluent

1 mL x 1

4℃

Standard (250 μmol/L)

1 mL x 1

4℃




 

另需自備的材料:酶標儀(可讀取605nm處的吸光度)、蒸餾水、移液器與槍頭、離心機、計時器等。

 

操作步驟(以組織樣本為例):

 

1、樣本處理:稱取1g組織,與1mL Assay buffer在冰上勻漿,10000g 4℃離心10min,取上清液至新離心管中,冰上保存待檢測。


2、試劑準備:


標準品:用蒸餾水二倍連續(xù)稀釋標準品;


圖 標準品二倍連續(xù)稀釋示例

 

Masking Reagent:使用1mL蒸餾水溶解(現(xiàn)配現(xiàn)用);
Dye Reagent:使用1mL Dye Reagent Diluent溶解Dye Reagent,70℃加熱助溶(現(xiàn)配現(xiàn)用)。


3、上樣:分別將140uL不同濃度的標準品、樣品加入相應孔中,另設置空白孔加入140uL蒸餾水;每孔分別加入40uL Reaction Buffer,10uL Masking Reagent以及10uL Dye Reagent,混合均勻,室溫孵育15min。

 

試劑

標準品孔

樣品孔

空白孔

標準品

140uL

--

--

樣品

--

140uL

--

蒸餾水

--

--

140uL

Reaction Buffer

40uL

40uL

40uL

Masking Reagent

10uL

10uL

10uL

Dye Reagent

10uL

10uL

10uL

 








4、檢測與計算:使用酶標儀測量605nm處的吸光度,擬合標準曲線并計算樣本濃度。


圖 標曲示例

 

注意事項:

 

1)金屬螯合劑(如EDTA)會干擾此分析,在樣品制備中應避免使用;
2)對于未知的樣品,建議多做幾個稀釋梯度進行預實驗,確保讀數(shù)在標準曲線范圍內;
3)試劑盒中的Dye Reagent需要現(xiàn)配現(xiàn)用,配好的溶液無法儲存,可能影響顯色讀數(shù)進而影響檢測;如果樣本需要分批檢測,建議分批收樣儲存,待樣本收齊后統(tǒng)一檢測;
4)每次實驗必須重新檢測并繪制標準曲線。


Absin生化檢測試劑盒——離子檢測系列:


貨號

品名

用途

abs580105

鐵離子檢測試劑盒

鐵離子(Fe3+)含量檢測

abs580140

銅離子檢測試劑盒

銅離子(Cu2+)含量檢測

abs580188

硒離子檢測試劑盒

硒離子含量檢測

abs580103

鉀離子檢測試劑盒

鉀離子(K+)含量檢測

abs580104

鈣離子檢測試劑盒

鈣離子(Ca2+)含量檢測

abs580106

鎂離子檢測試劑盒

鎂離子(Mg2+)含量檢測

abs580107

磷離子檢測試劑盒

磷離子含量檢測

abs580108

鋅離子檢測試劑盒

鋅離子(Zn2+)含量檢測

abs580110

孔雀綠磷離子檢測試劑盒

孔雀綠磷離子含量檢測

abs580146

鉻離子檢測試劑盒

鉻(Cr)離子含量檢測





 

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