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非變性聚丙烯酰胺凝膠電泳(Native-PAGE)或稱為活性電泳是在不加入SDS和巰基乙醇等變性劑的條件下，對保持活性的蛋白質(zhì)進行聚丙烯酰胺凝膠電泳，常用于酶的鑒定、同工酶分析和提純。與非變性凝膠電泳最大的區(qū)別就在于蛋白在電泳過程中和電泳后都不會變性，保證了蛋白質(zhì)功能。為什么SDS-PAGE需要對蛋白進行變性處理？在天然狀態(tài)下，蛋白以折疊的形式存在，且在同一分子內(nèi)同時具有正電荷和負電荷，電荷和折疊方式的不同，使具有相同分子量的不同蛋白質(zhì)在凝膠上以不同的速度遷移，這讓聚丙烯酰胺...

在這個充滿未知的科研世界里，每一次實驗都是對知識的探索，每一個數(shù)據(jù)都是對真理的追求。愛必信實驗室桌面小儀器，專為追求精確和效率的您設(shè)計。一、離心機系列1、復(fù)合轉(zhuǎn)子離心機復(fù)合轉(zhuǎn)子離心機采用“三合一”復(fù)合轉(zhuǎn)子設(shè)計。適用于：6x1.5/2.0mL離心管、6x0.5mL離心管、2x8x0.2mLP-CR排管、16x0.2mL離心管。用戶不需要更換轉(zhuǎn)子即可離心多種規(guī)格的離心管，方便使用、節(jié)省時間。轉(zhuǎn)速4000rpm、6000rpm、7000rpm三檔可調(diào)、定時功能滿足不同實驗需求。翻蓋...

在之前的文章中，小愛為大家介紹了IHC的原理以及樣本處理的實驗要點：答應(yīng)我，看完再做IHC（上）今天我們繼續(xù)看看接下來的實驗流程及操作要點。首先還是先來回顧一下IHC的整體流程：前期樣品處理的過程包括載玻片的制備，脫蠟/復(fù)水，抗原修復(fù)（上期內(nèi)容），然后我們需要做樣品的封閉，孵育一抗和二抗，以及底物檢測，最后的處理步驟包括脫水，封片和觀察。PART1我們介紹了樣品制備環(huán)節(jié)，今天我們繼續(xù)看下PART2抗體孵育及檢測。PART2抗體孵育及檢測（1）淬滅：如果使用基于酶或者生物素的檢...

重組蛋白是指利用DNA重組技術(shù)或重組RNA技術(shù)從而獲得并生產(chǎn)的蛋白質(zhì)。具體操作流程可以概括為利用中心法則采用基因重組分子克隆技術(shù)，獲得可以翻譯成目的蛋白的基因片段的重組載體，之后將其轉(zhuǎn)入可以表達目的蛋白的宿主細胞從而表達特定的重組蛋白分子。重組蛋白獲得的途徑分為體內(nèi)和體外生產(chǎn)，表達系統(tǒng)主要分為原核表達系統(tǒng)和真核表達系統(tǒng)。原核表達系統(tǒng)最常見的是利用大腸桿菌進行表達，真核表達系統(tǒng)主要為酵母蛋白表達、哺乳動物細胞蛋白表達（常用的細胞為CHO細胞、HEK293細胞）、昆蟲細胞蛋白表達...

概述腫瘤微環(huán)境(tumormicroenvironment,tme)是由腫瘤相關(guān)基質(zhì)細胞、免疫細胞，以及相應(yīng)細胞的分泌產(chǎn)物（如細胞因子和趨化因子）和細胞外基質(zhì)(ecm)中的非細胞成分組成的。腫瘤微環(huán)境為腫瘤提供了良好的生長環(huán)境和營養(yǎng)物質(zhì)，促進腫瘤的進展和轉(zhuǎn)移，這也是臨床中導(dǎo)致許多個體患者常規(guī)治療失敗的原因。腫瘤類器官相對于pdx動物模型，體外培養(yǎng)環(huán)境相對單純，而缺乏腫瘤微環(huán)境的類器官模型，又很難wan全模擬腫瘤對于藥物的反應(yīng)性，特別是免疫細胞隨著腫瘤類器官的培養(yǎng)，會逐漸功能下...

蛋白酶K，也稱為肽酶K或者精氨酸蛋白酶K，是一種重要的蛋白水解酶，廣泛存在于生物體內(nèi)，在細胞代謝、信號轉(zhuǎn)導(dǎo)、蛋白質(zhì)降解等生物學(xué)過程中發(fā)揮著關(guān)鍵作用。本文將介紹蛋白酶K的功能、結(jié)構(gòu)以及其在生物科學(xué)和醫(yī)學(xué)領(lǐng)域中的應(yīng)用。蛋白酶K主要功能于泛素-蛋白酶體系統(tǒng)中，參與調(diào)控細胞內(nèi)蛋白質(zhì)的降解和循環(huán)利用。其作用是通過降解不再需要的蛋白質(zhì)或者異常蛋白質(zhì)，從而維持細胞內(nèi)的蛋白質(zhì)平衡。蛋白酶K能夠識別并切割具有特定氨基酸序列的泛素化蛋白，將其降解成短肽或者氨基酸，為細胞再利用提供原料。此外，蛋白...

一、抗體偶聯(lián)藥物ADC介紹抗體偶聯(lián)藥物(Antibody-DrugConjugate,ADC)，是一種通過連接子將抗體與具有生物活性的小分子細胞毒性載荷連接起來的新型高效生物藥物（圖1）。ADC藥物的三大元件包括：1）特異性靶向抗體；2）毒素；3）可裂解/不可裂解的連接子。異性靶點識別及有效的毒素作用使ADC成為名副其實的“生物導(dǎo)dan”。ADC藥物的開發(fā)具有較高的技術(shù)壁壘，需要綜合考慮靶點的合理選擇；抗體、連接子、小分子藥物及它們之間的合理組合；抗體偶聯(lián)技術(shù)以及ADC藥物的...

IHC實驗是科研人bi備的實驗技能之一，然而IHC實驗流程復(fù)雜，而且經(jīng)常出現(xiàn)假陰性的結(jié)果，常常讓人頭疼。為此特別給大家整理了一份IHC實驗詳解，原理，步驟，注意事項及操作視頻一網(wǎng)打盡，想做IHC實驗只看這篇就夠了（分為上下兩篇哦）。IHC實驗原理免疫組織化學(xué)(Immunohistochemistry，IHC)：利用抗原－抗體特異性結(jié)合的原理，通過化學(xué)反應(yīng)使標記抗體的顯色劑顯色以確定細胞內(nèi)抗原，并對其進行定位、定性及定量的研究。和WB實驗相比，IHC實驗可以更為直觀的展現(xiàn)待測蛋...