各位老師們培養(yǎng)細(xì)胞時(shí)想必頭疼的就是各種污染問題,尤其是一些珍貴細(xì)胞,發(fā)現(xiàn)污染后更是欲哭無淚,有時(shí)候出現(xiàn)污染但是沒有留心則會(huì)影響整個(gè)實(shí)驗(yàn)進(jìn)度,所以小愛為大家掙了一下細(xì)胞培養(yǎng)出現(xiàn)的問題和處理方法,爭取讓老師們少走些彎路。一、黑膠蟲污染因?yàn)樾劢谑盏娇蛻舴答亴?shí)驗(yàn)細(xì)胞被黑膠蟲污染導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)無法進(jìn)行,所以這邊首先解一下黑膠蟲污染,黑膠蟲屬于一種爭議生物,有人認(rèn)為是從血清中來的一種原蟲,也有人認(rèn)為是細(xì)菌,或是真菌,也有人認(rèn)為是血清中的蛋白的結(jié)晶。"黑膠蟲"可寄生于動(dòng)物細(xì)胞,也可以生存于中...
細(xì)胞在體外能夠成功生長,培養(yǎng)基的選擇及培養(yǎng)方法的優(yōu)化十分關(guān)鍵。細(xì)胞在單純的培養(yǎng)基中不能存活,各種類型的細(xì)胞培養(yǎng)中必須提供某些生長因子、黏附和伸展因子、微量元素等營養(yǎng)物質(zhì)。傳統(tǒng)培養(yǎng)基中一般會(huì)添加動(dòng)物血清如牛血清等。胎牛血清應(yīng)取自剖腹產(chǎn)的胎牛;新牛血清取自出生24小時(shí)之內(nèi)的新生牛;小牛血清取自出生10-30天的小牛。其中胎牛血清是品質(zhì)較高的,因?yàn)樘ヅ_€未接觸外界,血清中所含的抗體、補(bǔ)體等對(duì)細(xì)胞有害的成分少。血清培養(yǎng)的優(yōu)勢(shì)與局限采用天然來源的血清作為細(xì)胞培養(yǎng)添加物,優(yōu)勢(shì)在于提供豐富...
生物學(xué)科作為實(shí)驗(yàn)學(xué)科,嚴(yán)謹(jǐn)是很重要的品質(zhì),相信很多小伙伴經(jīng)過長年實(shí)驗(yàn)的熏陶,已經(jīng)形成了一定程度的選擇困難。胎牛血清現(xiàn)在種類眾多,很多人都很難分辨出質(zhì)量的好壞,這就讓人們購買有難度了。畢竟買到劣質(zhì)的胎牛血清會(huì)很吃虧,這點(diǎn)必須注意。那么要怎樣分辨胎牛血清質(zhì)量的好壞?拿到血清,先接觸的是血清外觀,對(duì)于缺少細(xì)胞培養(yǎng)經(jīng)驗(yàn)的人來說,外觀的判斷尤為重要1、顏色根據(jù)血紅蛋白含量的不同,胎牛血清可表現(xiàn)出黃色或紅色,我國的細(xì)胞培養(yǎng)用血清標(biāo)準(zhǔn)是不高于20mg/dl,實(shí)際上,血紅蛋白含量的高低對(duì)血清...
上一期我們?yōu)榇蠹覅R總了ELISA實(shí)驗(yàn)原理、樣本準(zhǔn)備和預(yù)實(shí)驗(yàn)相關(guān)的十個(gè)常見問題及解答,可能有心急的小伙伴早就想要了解更多后續(xù)關(guān)于ELISA實(shí)驗(yàn)方面的問題了,不要走開,接下來將給您帶來相關(guān)解答~Q:invivo實(shí)驗(yàn)周期長,不太好做預(yù)實(shí)驗(yàn),對(duì)ELISA結(jié)果會(huì)有影響么?怎么辦?A:如果您實(shí)驗(yàn)室之前建立的invivo實(shí)驗(yàn)protocol經(jīng)過驗(yàn)證,可以保證有效性,那么,可以不用再進(jìn)行相關(guān)的預(yù)實(shí)驗(yàn);并且,如果實(shí)驗(yàn)周期較長,樣本獲取不易,同時(shí)又需要檢測(cè)較多指標(biāo),建議將樣品分裝凍存,避免反復(fù)凍...
脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)是所有革蘭陰性細(xì)菌外膜的主要組成部分,維持了細(xì)菌的結(jié)構(gòu)完整性,并保護(hù)細(xì)菌膜免受某些化學(xué)物質(zhì)的攻擊。LPS被稱為內(nèi)毒素,是革蘭陰性菌主要致病成分,可引起強(qiáng)烈免疫反應(yīng),導(dǎo)致幾乎所有的真核細(xì)胞發(fā)生形態(tài)、代謝和基因表達(dá)變化,刺激宿主細(xì)胞因子失控性表達(dá),發(fā)生嚴(yán)重感染。敗血癥就是由LPS引發(fā)的重要疾病之一,敗血癥發(fā)作時(shí),患者體內(nèi)LPS濃度將極大提高,以至于身體出現(xiàn)災(zāi)難性的炎癥反應(yīng)。大量實(shí)驗(yàn)證實(shí),LPS、LPS結(jié)合蛋白(lipopo-l...
植物血凝素(Phytohaemagglutinin,PHA)是一種發(fā)現(xiàn)于植物特別是豆科植物中的凝集素(lectin),屬于高分子糖蛋白類,是低聚糖(由半乳糖,N-乙酰葡糖胺和甘露糖所構(gòu)成)和蛋白質(zhì)的復(fù)合物,具有促進(jìn)外周血淋巴細(xì)胞(PBMC)有絲分裂和誘導(dǎo)干擾素分泌的活性。在生命科學(xué)領(lǐng)域,植物血凝素被應(yīng)用為一種促細(xì)胞分裂原(mitogen),在體外能刺激小淋細(xì)胞轉(zhuǎn)化成具有免疫活性的淋細(xì)胞,并促進(jìn)其分裂。轉(zhuǎn)化的淋巴細(xì)胞能分泌各種淋巴因子。主要應(yīng)用如下:1、PHA對(duì)外周周血淋巴細(xì)胞...
白細(xì)胞介素4(interleutin-4,IL-4),屬于紅細(xì)胞生成素超家族成員,位于活化T細(xì)胞,在Th2亞群產(chǎn)生,此外,肥大細(xì)胞、IL2刺激小鼠T細(xì)胞系2.19、ConA刺激人Th克隆2F1、小鼠胸腺瘤EL-4細(xì)胞以及B細(xì)胞系CH2均能分泌IL-4,IL4分子量為140kDa,胞膜外區(qū)209氨基酸,跨膜區(qū)24氨基酸,胞漿區(qū)569氨基酸。IL可促使抗原活化的B細(xì)胞分裂增殖,但其作用較IL-2稍弱,而IL-4能促使靜止的B細(xì)胞表達(dá)MHCⅡ類分子、FcεRⅡ/CD23和CD40的...
二抗是在其它宿主體內(nèi)制備的能與一抗或一抗片段結(jié)合的抗體,根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求,二抗上通常連有酶或熒光素等標(biāo)簽。由于二抗所具備的優(yōu)點(diǎn)使得其在免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)中得以廣泛應(yīng)用,如WB/ELISA/IHC/IP等。二抗針對(duì)某一特定物種的所有抗體均具有特異性,因而使用特定標(biāo)記的二抗可以免去對(duì)每一個(gè)一抗進(jìn)行標(biāo)記,大大節(jié)省了時(shí)間和費(fèi)用;此外,一個(gè)一抗分子可以同時(shí)結(jié)合幾個(gè)二抗分子,從而使信號(hào)大大增強(qiáng),提高了實(shí)驗(yàn)靈敏度。二抗,廣義上是指專門和一抗進(jìn)行特異性反應(yīng)和結(jié)合的抗體。檢測(cè)任何目的靶蛋白都有不止一種抗體...
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