【技術(shù)原理】多重免疫組化,主要的技術(shù)原理來自TSA技術(shù),TSA即酪酰胺信號放大(Tyramidesignalamplification)是一類利用辣根過氧化酶(HRP)對靶蛋白或核酸進(jìn)行高密度原位標(biāo)記的酶學(xué)檢測方法。該技術(shù)可與高性能染料AlexaFluor®、傳統(tǒng)熒光染料和比色檢測系統(tǒng)相兼容。TSA主要原理是利用酪胺Tyramide的過氧化物酶反應(yīng)(酪胺鹽在HRP催化H202下形成共價鍵結(jié)合位點(diǎn)),產(chǎn)生大量的酶促產(chǎn)物,該產(chǎn)物能與周圍的蛋白殘基(包括色氨酸、組氨酸和酪氨...
胰島素(Insulin)是由胰島β細(xì)胞分泌的一種A和B雙鏈構(gòu)成的多肽激素,由51個氨基酸組成,分子量約5800Da。兩條鏈由兩對鏈間二硫鍵連接,另外A鏈自身還含有一對鏈內(nèi)二硫鍵。胰島素是目前已知的機(jī)體內(nèi)能降低血糖的激素,不僅負(fù)責(zé)調(diào)控細(xì)胞對葡萄糖、氨基酸和脂肪酸的攝入、利用和儲存,而且抑制糖原、蛋白質(zhì)和脂肪的降解發(fā)生。不同物種胰島素的功能大體相同,只是在氨基酸組成上有細(xì)微差異。人胰島素分子結(jié)構(gòu)示意圖胰島素在許多細(xì)胞活動中發(fā)揮重要作用,如促進(jìn)糖和氨基酸轉(zhuǎn)運(yùn),提高合成代謝降低分解代...
免疫抑制劑系能降低免疫反應(yīng)的藥物。能選擇性地作用于所需抑制的某一免疫反應(yīng)環(huán)節(jié)和免疫細(xì)胞。免疫是指機(jī)體對各種致病性物質(zhì)的反應(yīng),此種反應(yīng)有的對機(jī)體有利,可增強(qiáng)機(jī)體的抗病能力;有的對機(jī)體不利,可造成生理機(jī)能的紊亂或組織損傷,故對因發(fā)生有害于機(jī)體的反應(yīng)者應(yīng)用免疫抑制劑以影響免疫過程的有關(guān)環(huán)節(jié)而降低機(jī)體的免疫反應(yīng)性。為了治療各種免疫性疾病以及減弱組織不相容性,已發(fā)展了多種免疫抑制劑,其中一些已廣泛應(yīng)用于臨床。免疫抑制劑種類繁多,常用的免疫抑制劑有糖皮質(zhì)激素類(潑尼松、氫化潑尼松等)、烴...
ELISA(免疫酶聯(lián)吸附實(shí)驗(yàn))是免疫學(xué)基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)之一,大部分生命科學(xué)領(lǐng)域的科研工作者對其都不陌生。因?yàn)槠涮禺愋詮?qiáng),靈敏度高,可精確定量的特性,在基礎(chǔ)科研和臨床診斷中,ELISA技術(shù)都應(yīng)用廣泛,相信很多關(guān)注我們的小伙伴也都做過ELISA。ELISA實(shí)驗(yàn)步驟少,流程短,購買的即用型試劑盒也都有指導(dǎo)性很強(qiáng)的操作說明書,單次實(shí)驗(yàn)3-6小時即可得到結(jié)果,實(shí)驗(yàn)小白也可以很快的上手。但是,各位同學(xué)可不要輕視哦,ELISA和WB、IHC等基礎(chǔ)免疫實(shí)驗(yàn)一樣,都是易學(xué)難精,上手容易,但想要得到穩(wěn)定...
活性氧自由基ROS造成的DNA損傷是腫瘤發(fā)生和發(fā)展的關(guān)鍵因素,DNA分子的主要氧化產(chǎn)物8-氧-鳥嘌呤(8-oxo-7,8-dihydroguanine;8-oxo-Gua)被認(rèn)為是DNA氧化損傷的生物標(biāo)志物。8-oxo-Gua具有高度致突變性,在通過DNA聚合酶進(jìn)行復(fù)制時,產(chǎn)生G:C—T:A顛換突變,而在哺乳動物細(xì)胞中,主要通過OGG1介導(dǎo)的堿基切除修復(fù)(baseexcisionrepair,BER)通路清除8-oxo-Gua。OGG1蛋白功能缺陷可使機(jī)體罹患癌癥的易感性增高...
(Toll-likereceptors)TLR主要由先天免疫細(xì)胞表達(dá),并參與誘導(dǎo)和調(diào)節(jié)適應(yīng)性免疫應(yīng)答。屬于固有免疫病原模式識別受體,可以識別入侵機(jī)體的病原微生物的蛋白質(zhì)、核酸和脂類及其在反應(yīng)過程中合成的中間產(chǎn)物和代謝產(chǎn)物,如革蘭陰性細(xì)菌的脂多糖(LPS)、革蘭陽性菌的肽多糖和病毒的雙鏈RNA等,這些都是屬于分子結(jié)構(gòu)高度保守的PAMP(Pathogen-associatedmolecularpattern,病原相關(guān)分子模式)。TLR是一組跨膜受體家族,其通過激活核因子-κB(N...
淋巴結(jié)分離液盡管相對密度接近血細(xì)胞和單獨(dú)核細(xì)胞中間,但其整體仍然比血夜相對密度小。假如先加淋巴結(jié)分離液得話,它就會浮在血夜上邊,抽濾的那時候不可以和血夜充足攪拌,危害分離實(shí)際效果;先加淋巴結(jié)分離液則不同,那樣抽濾的那時候兩者1個往下1個往上產(chǎn)生相對速度,和占較為大的血細(xì)胞*互換部位,促使攪拌十分充足,進(jìn)而確保瓦解實(shí)際效果。淋巴細(xì)胞分離液大約是由聚綿白糖、泛影酸葡、燒堿等配置成溶液,經(jīng)殺菌而成。相對密度1.13。用以分離全血中淋巴細(xì)胞。人們試驗(yàn)室常見的是GE企業(yè)的用以分離人的淋...
淋巴細(xì)胞分離液是一種用于分離人外周血淋巴細(xì)胞的無菌、低內(nèi)毒素水平的密度梯度分離液。其分離原理是根據(jù)血細(xì)胞的密度差異,通過離心使一定密度的細(xì)胞按相應(yīng)密度梯度分布,從而將淋巴細(xì)胞從人外周血或臍帶血中分離出來。分離純度:使用人淋巴細(xì)胞分離液分離淋巴細(xì)胞的分離純度大于90%。淋巴細(xì)胞分離方法有哪些?主要包括粘附貼壁法,吸附柱過濾法,磁鐵吸引法。一、粘附貼壁法:將已制取的單獨(dú)核細(xì)胞懸浮液傾于玻璃或塑膠培養(yǎng)皿或偏平小瓶中,挪到37℃溫箱浸泡1小時上下,淋巴細(xì)胞和粒細(xì)胞均貼于平皿內(nèi)壁,而未...
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