細(xì)胞中如果污染細(xì)菌，最常見的有枯草桿菌等革蘭陽性菌以及大腸桿菌、假單孢菌等革蘭陰性菌，其中又以白色葡萄球菌較常見。培養(yǎng)細(xì)胞受細(xì)菌污染后，會(huì)很快出現(xiàn)培養(yǎng)液變混濁，pH 改變。

　　也有少數(shù)培養(yǎng)液肉眼觀察無多少改變，只能在鏡下發(fā)現(xiàn)菌體才知污染。所以，每天應(yīng)仔細(xì)觀察。污染后細(xì)胞發(fā)生病理改變，胞內(nèi)顆粒增多、增粗，最后變圓脫落死亡，造成實(shí)驗(yàn)失敗和細(xì)胞株(系)丟失。

　　細(xì)胞污染的來源

　　無菌觀念薄弱，穿戴不注意

　　進(jìn)細(xì)胞房不換鞋，不戴口罩，不戴手套，是細(xì)胞房的大忌諱！有更嚴(yán)格的細(xì)胞房連帽子都要戴上。為什么呢？換鞋是為了隔離真菌。戴口罩是為了防止口腔支原體不會(huì)污染細(xì)胞了。不戴手套，根本就清除不掉你手上的細(xì)菌真菌，要不你試試看拿火燎一下你的手，焦了才算滅菌。

　　紫外線和酒精滅菌，不能亂用

　　能滅菌，但是紫外和酒精最多只能滅細(xì)菌，對(duì)真菌傷害很小。你不戴手套，僅用噴壺噴手是沒有什么用的。超凈臺(tái)為什么盡量要用酒精棉球而不是用酒精噴壺呢？因?yàn)橛镁凭耷虻脑?，可以在滅菌的同時(shí)把菌體從手上擦下去。而噴壺只能短暫滅菌而已，所以要多用棉球，少用噴壺。

　　使用生物安全柜，別超安全線

　　生物安全柜的玻璃窗是有警戒線的，超過這個(gè)警戒線，生物安全柜的風(fēng)簾就起不到太大作用，且會(huì)引入室內(nèi)空氣中的真菌，比如你的臭鞋里的酵母啥的。還會(huì)讓你給細(xì)胞送溫暖的呼吸里，自動(dòng)帶上支原體。

　　拿細(xì)胞培養(yǎng)瓶的時(shí)候不注意操作

　　用細(xì)胞培養(yǎng)瓶來培養(yǎng)的時(shí)候，最忌諱的是你拿瓶子的時(shí)候，手拿著有蓋子的那一面。因?yàn)橐话銇碚f瓶蓋開關(guān)是最容易接觸到瓶口的，你手拿著培養(yǎng)瓶，那手的虎口夾縫里所含有的真菌很容易就接觸到瓶蓋上，一旦造成污染，就是很嚴(yán)重的。

　　實(shí)驗(yàn)用品亂擺放

　　生物安全柜里操作的時(shí)候，門前最忌諱堆一堆雜七雜八的東西，槍頭盒、血清、管子，培養(yǎng)皿、移液器、酒精噴壺、酒精燈，堆了一大堆。有的都堵住了安全柜門前的出風(fēng)口。一來會(huì)導(dǎo)致操作起來并不是井井有條，會(huì)導(dǎo)致動(dòng)作幅度過大，擾亂氣流。二來這些東西一旦擋住風(fēng)口，也會(huì)擾亂生物安全柜的氣流，氣流變化會(huì)導(dǎo)致外部不潔凈的空氣流入，也同樣會(huì)導(dǎo)致生物安全柜的潔凈作用失效。

　　不注意清潔水浴鍋

　　水浴鍋是比較容易忽視的，復(fù)蘇細(xì)胞的時(shí)候，37℃，對(duì)細(xì)菌真菌來說這就是溫床啊。復(fù)蘇完，濕漉漉的凍存管，任你再怎么噴酒精也并沒有什么意義了。那要怎么辦，水浴鍋一來是定期清潔，二來是加一些抑菌劑

　　水盤污染

　　培養(yǎng)箱的水盤也是坐擁37℃溫床的水環(huán)境。水盤里若是飄著特別大的一塊塊霉斑。一污染就一箱子全報(bào)廢了，培養(yǎng)箱要定期用0.1%的新潔爾滅或者84清洗(交替使用，防止微生物耐藥)。水盤也一樣，水盤中加入飽和的磷酸氫二鈉可以有效預(yù)防細(xì)菌真菌，但是需要定期加入去離子水防止析出。

　　滅菌滅不好

　　細(xì)胞房所使用的槍頭，必須要經(jīng)過濕熱滅菌， 用報(bào)紙包裹好槍頭，是因?yàn)闇缇佉话阍诩?xì)胞房外面，所以要保證內(nèi)部槍頭盒結(jié)晶。烤干是為了防止內(nèi)部有水分，當(dāng)你開啟槍頭盒后，有水的地方更容易被霉菌的孢子所接觸附著，也就更容易污染。所以這個(gè)也必須要注意！